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[多选题]PCR引物设计的原则包括
  • A引物长度以18～25个核苷酸为宜
  • B5'端的第一、二个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率，与模板应严格配对
  • C3'端可加修饰成分，如酶切位点、生物素标记等，便于产物分析和克隆等
  • D通常位于基因组DNA的高度保守区，最好跨越两个外显子
  • EGC含量以45%～55%为宜
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