答案解释:
TaqMan探针的特点包括:TaqMan探针的T[XBzm.gif]值应比引物的T[XBzm.gif]值高5~10℃,以保证引物延伸时探针完全杂交于模板上。通常其T[XBzm.gif]为65~72℃,此时Taq DNA聚合酶有理想的核酸外切酶活性。TaqMan探针的5'端不要有G,因为即使探针被酶切降解,5'端所含的G仍具有淬灭报告荧光的作用。TaqMan探针的3'端要进行封闭,以防止在PCR中作为引物而延伸模板链。探针中的G不能多于C,避免单一核苷酸成串,尤其是G。探针应尽可能短,使其具有最大的检测能力。如果探针用于检测等位基因差异或突变位点,应将错配核苷酸放在探针中间,不能放在末端。